告别标记物混乱!流式免疫细胞全表整理·人鼠对照版

流式细胞术作为免疫学研究的关键技术,通过对细胞表面及胞内标记物的多参数分析,实现对免疫细胞的高通量、单细胞水平鉴定与功能解析。然而,免疫细胞具有高度异质性(如T细胞亚群、髓系细胞分化谱系)和动态性(活化/耗竭状态转变),且人源与小鼠模型间存在显著种属差异(如NK细胞标记NK1.1 vs. CD56)。这些复杂性使得研究者需系统整合细胞定义、标记物组合及圈门策略,才能精准识别目标群体。

 

本文系统汇总流式常用免疫细胞及标记物,实验必备速查指南,建议收藏备用!

 

关键补充说明


SUPPLEMENT

 

红细胞与血小板流式要点

细胞类型

标记物与操作要求

注意事项

红细胞

人:CD235a⁺
小鼠:Ter119⁺

必须裂解红细胞(避免信号干扰)

血小板

CD41⁺/CD61⁺(整合素αIIbβ3)

防聚集:EDTA抗凝 + 轻柔处理

 

巨核细胞特殊要求

检测难点

解决方案

激活标记

体积巨大(50-100μm)

调整FSC电压/使用特殊缓冲液

CD62P⁺(P-选择素)
PAC-1(活化GPIIb/IIIa)

易堵塞流式细胞仪管路

降低进样流速 + 预过滤样本

_

 

 

粒细胞亚群区分

种属

中性粒细胞

嗜酸性粒细胞

嗜碱性粒细胞

CD16⁺/CD66b⁺

CCR3⁺/Siglec-8⁺

CD123⁺/FcεRI⁺

小鼠

Ly6G⁺

Siglec-F⁺

FcεRI⁺/CD200R3⁺

 

 

NKT细胞鉴定要点

种属

核心标记

品系注意事项

CD3⁺/CD161⁺
或 Vα24-Jα18⁺(恒定型)

需联合TCR与NK受体检测

小鼠

CD3⁺/NK1.1⁺

BALB/c等品系改用 CD49b⁺(DX5)替代NK1.1

 

功能/活化标记扩展

细胞类型

状态

标记物组合

T细胞

耗竭

PD-1⁺/TIM-3⁺/LAG-3⁺

巨噬细胞

M1型

CD80⁺/CD86⁺

_

M2型

CD163⁺/CD206⁺

 

实验注意事项

检测类型

关键步骤

典型案例

胞内标记

需固定破膜

FoxP3⁺/Ki-67⁺/细胞因子(IFN-γ/IL-4)

稀有细胞

需预富集或提高事件量

巨核细胞:CD41⁺/CD42⁺
嗜碱粒:FcεRI⁺/CD123⁺

跨物种标记

验证种属特异性

人CD16=FcγRIII,小鼠CD16=NK细胞标记

 

 

创建时间:2025-08-15 15:18