动物模型构建丨小鼠胆总管结扎致肝纤维化模型

肝纤维化是多种慢性肝损伤后肝脏修复反应的共同病理结局，其特征是细胞外基质过度沉积，导致肝组织结构与功能进行性破坏。胆汁淤积是引发肝纤维化的重要病因之一，包括原发性胆管炎、原发性硬化性胆管炎等疾病均以长期胆汁淤积为核心病理环节。因此，建立可靠、稳定的胆汁淤积性肝纤维化动物模型，对于深入探究该疾病的发病机制、病理进展及潜在治疗策略具有重要意义。

本文将系统介绍小鼠胆总管结扎诱导的肝纤维化模型。该模型通过外科手术结扎胆总管，模拟胆汁淤积性肝病的病理过程，是研究肝纤维化、肝硬化及其相关分子机制的重要实验工具。

小鼠胆总管结扎致肝纤维化模型

本模型通过手术方法结扎实验小鼠的胆总管，造成肝外胆道机械性梗阻，使胆汁无法正常排入十二指肠，从而引发肝内及全身胆汁淤积。滞留的胆汁酸等成分可引起肝细胞损伤、胆管上皮细胞增生及强烈的炎症反应，进而激活肝星状细胞，促进细胞外基质大量合成与沉积，最终导致肝纤维化形成。

模型构建及评估

开腹暴露：麻醉后沿腹中线切口，打开腹腔，轻柔移开肠管，暴露肝门区及胆总管。

分离结扎：仔细游离胆总管，预置并双重结扎，于两结扎线间剪断胆总管。

关腹复位：检查无出血后，将脏器复位，逐层缝合腹腔。

体表体征：术后24-48h内即可出现明显黄疸（耳、尾、皮肤变黄）。

体重变化：术后初期体重下降，后期部分小鼠出现消瘦、弓背。

尿液与解剖：尿液深黄浓稠；解剖可见胆囊显著扩张、胆总管近端膨大，肝脏表面出现黄绿色斑点（胆汁色素沉着）。

生化指标：血清呈深黄色，丙氨酸氨基转移酶（ALT）、天门冬氨酸氨基转移酶（AST）、碱性磷酸酶（ALP）及总胆红素（TBIL）水平急剧升高，可达正常值数十倍。

评估该肝纤维化模型的成功率需结合多维度指标：

🖊  组织病理学评估

H&E染色：观察肝组织结构破坏、炎性细胞浸润、胆管增生及坏死情况。

特殊染色：采用Masson染色或天狼星红染色，直观显示并半定量分析肝内胶原纤维的沉积范围与程度。

免疫组织化学：检测α-平滑肌肌动蛋白（α-SMA）以评估肝星状细胞活化，或检测Ⅰ型胶原（COL1A1）等直接反映纤维化程度。

🖊  血清生化学评估

肝损伤指标：ALT、AST显著升高。

小鼠胆总管结扎模型是研究胆汁淤积性肝纤维化的一种经典、有效且病理特征明确的工具。成功的建模依赖于精细的手术操作、严格的术后护理以及全面、多层次的评估验证。通过该模型获得的研究成果，有望为深入理解胆汁淤积性肝病的发病机理及开发新的治疗策略提供坚实可靠的实验依据。